إجابة: أشارت دراسات PK/PD إلى التوافر البيولوجي لـ 100% في القلب والشريان الأورطي والكلى. كانت الكلى هي الأنسجة الوحيدة التي كان هناك اقتراح لتراكمها، بناءً على الفحص النسيجي وبيانات PK/PD. أظهر تناول جرعة واحدة من SRP-2001 أن PPMO تم تطهيره بسرعة من القلب (في غضون ساعتين)، وتم تطهيره من الشريان الأورطي في غضون 4 ساعات، ولكن استمر في الكلى حتى نقطة زمنية 48 ساعة. أظهر ddPCR الكمي نشاط تثبيط الوصل الخفي G608G في جميع الأنسجة باستثناء الجلد التي تم اختبارها حتى الآن (الشريان الأورطي والقلب والكلى والكبد والعضلة الرباعية الرؤوس والعظام)، على الرغم من أن النشاط يختلف اعتمادًا على الأنسجة.

فرانسيس، مايك، وواين

إجابة:بخصوص هذا السؤال، بصراحة، لا أعرف إجابة هذا السؤال. ومع ذلك، في حالة البالغين العاديين، لا نربط بين درجة التكلس الصمامي وبين تناول المغنيسيوم/الكالسيوم، ومن المرجح أن يكون التكلس الأثقل ناتجًا عن عوامل أخرى.

الدكتور بيناك شاه

إجابة: أتفق مع رأي الدكتور شاه. من المحتمل أن أسباب تكلس الصمامات في HGPS تختلف عن تلك التي نراها في المرضى المسنين. كما أنني لا أعرف أي شيء عن أيض الكالسيوم والمغنيسيوم.

الدكتور فرانسيسكو موسوميسي

إجابة: الصفيحة A/C null (لمنا^-/-) يصاب نموذج الفأر باعتلال عضلة القلب التوسعي مصحوبًا بفقدان وظيفة القلب. علاوة على ذلك، تظهر هذه الفئران عيوبًا في التوصيل القلبي وتليفًا قلبيًا واسع النطاق، والوفاة المبكرة في عمر 5-8 أسابيع (أوغست وآخرون، 2018؛ فروك وآخرون، 2012؛ سوليفان، 1999). ومع ذلك، فإن نماذج الفئران التي تفتقر فقط إلى لامين أ (فونج وآخرون، 2006) أو لامين سي (كوفينير وآخرون، 2010) لا تظهر عيوبًا في القلب ولها عمر طبيعي.

مراجع:
Auguste, G., Gurha, P., Lombardi, R., Coarfa, C., Willerson, JT, & Marian, AJ (2018). تثبيط عوامل النسخ FOXO المنشطة في القلب يطيل فترة البقاء على قيد الحياة في نموذج الفأر لاعتلالات الصفيحة. https://doi.org/10.1161/CIRCRESAHA.117.312052

Coffinier, C., Jung, HJ, Li, Z., Nobumori, C., Yun, UJ, Farber, EA, Davies, BS, Weinstein, MM, Yang, SH, Lammerding, J., Farahani, JN, Bentolila, LA, Fong, LG, & Young, SG (2010). يؤدي التخليق المباشر للامين أ، متجاوزًا معالجة البريلامين أ، إلى تشوه النوى في الخلايا الليفية ولكن لا يمكن اكتشاف أي أمراض في الفئران. مجلة الكيمياء الحيوية, 285(27)، 20818–20826. https://doi.org/10.1074/jbc.M110.128835

Fong, LG, Bergo, MO, Young, SG, Fong, LG, Ng, JK, Lammerding, J., Vickers, TA, Meta, M., Coté, N., Gavino, B., Qiao, X., Chang, SY, Young, SR, Yang, SH, Stewart, CL, Lee, RT, Bennett, CF, Bergo, MO, & Young, SG (2006). يبدو أن البريلامين أ واللامين أ يمكن الاستغناء عنهما في الصفيحة النووية. مجلة البحوث السريرية, 116(3)، 743-752. https://doi.org/10.1172/JCI27125.with

Frock, RL, Chen, SC, Da, D., Frett, E., Lau, C., Brown, C., Pak, DN, Wang, Y., Muchir, A., Worman, HJ, Santana, LF, Ladiges, WC, Rabinovitch, PS, & Kennedy, BK (2012). التعبير الخاص بالخلايا العضلية القلبية عن اللامين أ يحسن وظيفة القلب في فئران Lmna-/-. بلوس ون, 7(8)، 1-9. https://doi.org/10.1371/journal.pone.0042918

سوليفان، ت. (1999). فقدان التعبير عن اللامين من النوع أ يعرض سلامة الغلاف النووي للخطر مما يؤدي إلى ضمور العضلات. مجلة علم الأحياء الخلوية, 147(5)، 913-920. https://doi.org/10.1083/jcb.147.5.913

سؤال: من توم ميستلي: كم من الوقت استغرق علاج لونافارنيب + توزيليزوماب في الحيوانات؟
إجابة: لقد أجرينا تجربة أولية على الحيوانات غير المتجانسة بدءًا من الأسبوع 22 وحتى الأسبوع 30. نود التركيز على هذا الإطار الزمني لتقييم التأثير على زيادة الوزن الذي لوحظ سابقًا مع عقار توسيليزوماب.

سؤال: من سغونزالو: قصة جميلة جيوفانا وسامي!!! هل لاحظتم أي آثار جانبية لعلاج توسيليزوماب؟ أو أي أنماط ظاهرية لم تتحسن في فئران بروجيريا؟ إلى الدكتورة جيوفانا لاتانزي: سؤال: من توم ميستلي: كم من الوقت استغرق علاج لونافارنيب + توزيليزوماب في الحيوانات؟
إجابة: شكرًا لك سوزانا. لا، لم نلاحظ أي آثار جانبية لتوسيليزوماب. من بين الأنماط الظاهرية التي تم فحصها (حداب العمود الفقري، ضمور الأنسجة الدهنية، عيوب الشعر والجلد، النشاط الحركي، آفات الأبهر وفرط عضلة القلب) تأخرت/تحسنت.

تعليق: من ماري جيرهارد هيرمان: يستخدم أيضًا في الولايات المتحدة لعلاج أمراض الروماتيزم والتهاب الأوعية الدموية
رد: شكرًا لك ماري على هذه المعلومات المثيرة للاهتمام حول استخدامها لعلاج التهاب الأوعية الدموية.

تعليق: من جهاز الكمبيوتر ستيفانو: تمت الموافقة أيضًا على عقار توسيليزوماب في اليابان لعلاج مرض كاسلمان دون أي تأثيرات مثبطة للمناعة
رد: شكرا لك ستيفانو على هذه المعلومات.

سؤال: من دلفين لاريو: هل لاحظت أي انخفاض في تلف الحمض النووي عند علاج البروجيرينين في خلايا HGPS / نماذج فئران HGPS؟
إجابة: لقد لاحظنا أن الجينات المرتبطة بإصلاح الحمض النووي (BRCA1، Rad51، وما إلى ذلك) تغيرت بعد العلاج بالبروجيرينين.

سؤال: من دلفين لاريو: كيف يعمل البروجيرينين في فيرنر
متلازمة لا تعبر عن البروجيرين على حد علمي؟ هل للجزيء أهداف أخرى؟
إجابة: يمكن لخلايا WS أيضًا إنتاج كمية صغيرة من البروجيرين مثل الخلايا الجذعية المسنة الطبيعية
الخلايا. لقد لاحظنا تعبير البروجيرين في خلايا WS على مستويات mRNA.
نعتقد أن بروتين WRN يمكن أن يعمل على تثبيط البروجيرين. ومع ذلك، في
في حالة مرضى WS، نظرًا لعدم وجود بروتين WRN، فإن التعبير عن البروجيرين يكون
يُعتقد أنه يحدث في العشرينات والثلاثينيات من العمر، كما يحدث في الأشخاص الذين تتراوح أعمارهم عادةً
الناس.

سؤال: من بوب بيشوب: هل يتم تحديد موقع ربط البروجيرينين كيميائيًا أو
بنيويًا؟ هل هناك اختبار كيميائي حيوي للعثور على مركبات إضافية
مع هذه الآلية؟
إجابة: لقد أجرينا اختبار سحب حبيبات البيوتين والأفيدين ولاحظنا
تفاعل محدد بين البيروجيرينين والبروجيرين ولكن ليس مع اللامين أ واللامين
ب، ص53، أو إيميرين.
لقد أجرينا أيضًا اختبار إليزا للعثور على مركبات إضافية يمكن أن
من المفترض أن تكون مثبطات ربط البروجيرين/لامين أ. تم تحضين بروتين البروجيرين المعاد تركيبه بشكل متسلسل باستخدام مكتبة كيميائية ولامين أ.
ومع ذلك، كان البروجيرينين هو المادة الكيميائية الأكثر فعالية في الدراسة الكيميائية.
مكتبة.

سؤال: من جون كوك: تقدم كبير يا دكتور كيم. هل يقلل البروجيرينين من
إفراز السيتوكينات SASP؟
إجابة: لقد لاحظنا أن البروجيرينين يمكن أن يقلل من التعبير عن IL6 وIL8 في
خلايا HGPS.

سؤال: من سوزان مايكلز: هل البروجيرينين متاح للباحثين؟
إجابة: بالطبع، إنه متاح إذا قمت بالطلب.

سؤال: من توماس دبليو جلوفر: ربما فاتني ذلك ولكن ما رأيك هو
ما هي الآلية المسؤولة عن التأثيرات المفيدة في متلازمة فيرنر؟
إجابة: تنتج الخلايا المشتقة من مرضى WS أيضًا كمية صغيرة من البروجيرين، مثل
مثل الخلايا الطبيعية المشتقة من كبار السن. يمكن أيضًا إنتاج البروجيرينين
فعالة في خلايا WS عن طريق تقليل التعبير عن البروجيرين.

إجابة: شكرًا على السؤال: لا، ليس الالتهاب في حد ذاته. يرتبط الالتهاب جزئيًا بالبلعميات، وقد درسنا الخلايا البلعمية في هذا المشروع ووجدنا أن إخراج اي سي ام تي في زيادة تدفق الكوليسترول من الخلايا البلعمية، سواء كان أساسيًا أو محفزًا بواسطة ApoAI وHDL. نظرًا لأن هذا التأثير يرتبط أحيانًا بزيادة نقل الكوليسترول العكسي في الجسم الحي، نود تحديد ما إذا كان اي سي ام تي إن تثبيط هذا الهرمون من شأنه أن يقلل من تطور تصلب الشرايين.

سؤال: من فاندريس: هل قمت بمحاولة تصحيح الحمض النووي في الخلايا الليفية البشرية HGPS من مختلف الأعمار (في المختبر) واختبرت تطبيع النمط الظاهري الخاص بها لمعرفة ما إذا كان يتناقص مع تقدم الخلايا في العمر؟
إجابة: لا، لم نحاول التصحيح في الخلايا الليفية من مرضى في أعمار مختلفة - فقط من مريضين مختلفين، والتي أعطت نتائج مماثلة.

سؤال: من دلفين لاريو: تأثيرات مذهلة! هل تتوقع أن يكون البروجيرين فعالاً بشكل كامل في الفئران المتغايرة الزيجوت؟
إجابة: في الفأرة ذات النسخة الواحدة، لن أتوقع بالضرورة اختلافًا كبيرًا في كفاءة التحرير عما نلاحظه حاليًا، نظرًا لأنه يجب أن يكون هناك بالفعل فائض من عامل التحرير لكل بروجيرين.

سؤال: من أندريه مونتيرو دا روشا: هل تعتقد أن إعادة برمجة نسبة منخفضة من الخلايا يمكن أن يؤدي إلى إصلاح وظيفة الخلايا الجذعية، ولكن قد يؤدي إلى استنفاد الخلايا الجذعية البالغة؟
إجابة: ليس لدينا أية بيانات يمكنها أن تعطينا إجابة على هذا السؤال.

سؤال: من مي: يبدو مثل خلية عضلة القلب، تلطيخ جميل!
من آبي بوشوالتر: هل يؤدي التعبير السلبي السائد عن Sun1 إلى تعطيل جميع مجمعات LINC، بما في ذلك تلك التي يتوسطها Sun2؟
إجابة: نعم، هناك دليل على ذلك في المختبر حيث يمكن استبدال جميع Nesprins في NE بواسطة DNSUN1

سؤال: من Suet Nee Chen: كيف وما هي الآلية التي يمكن أن يكون بها AAV9-SunDn قادرًا على إحداث تأثيرات طويلة المدى؟ في أي عمر قمت بحقن AAV9-Sun1DN في الفئران المتحولة LMNA؟
إجابة: لقد حقننا بروتين DNSUN1 AAV بعد يوم واحد من تحريض إنزيم Cre recombinase لحذف laminA. لدينا بيانات تشير إلى أن بروتين DNSUN1 الذي تم نقله بواسطة AAV يستمر في التعبير عنه في الخلايا العضلية القلبية بعد عام من الحقن. نحن نجري تجارب الجرعة/التوقيت/الاستجابة الآن بعد أن عدنا إلى المختبر ويمكننا صنع بروتين AAV الخاص بنا بكميات كافية

سؤال: من Martin Bergö، Viceordförande Kommittén för forskning: ما رأيك في المساهمة النسبية لغياب الصفيحة A مقابل الصفيحة C في تجارب خروج Lmna الخاصة بك؟
إجابة: لست متأكدًا من هذا، لكن Sun1 يتفاعل مع LaminA وفي فئران HGPS، يجب أن تكون المساهمة كلها من LaminA (التي يشتق منها البروجيرين)

سؤال: من jcampisi: ما هو سبب الوفاة في SUN1 KO أو hets؟
إجابة: سؤال جيد، ما زلنا لا نعرف السبب ولكننا نشتبه حاليًا في وجود مجموعة من العضلات الهيكلية. نحتاج إلى إجراء تحليل نسيجي مرضي مناسب للفئران المحتضرة

سؤال: من توم ميستلي: كولين: هل لاحظت تغييرات في مسارات الاستجابة للإجهاد الخلوي في حيوانات Lmna/Sun؟
إجابة: لم نقم بعد بقياس أي جينات/علامات استجابة للإجهاد في هذه الفئران

السؤال: من دلفين لاريو: هل تتخيل استهداف القلب فقط باستخدام DNSUN1 في مرضى HGPS؟
إجابة: من الممكن أن يتم ذلك بالنظر إلى النمط المصلي واستخدام محفز خاص بعضلة القلب. هذه التجارب جارية حاليًا

سؤال:من Yuexia Wang: لماذا يكون لـ KO SUN1 فائدة أقل على الفئران المتماثلة اللواقح G609G؟
إجابة: من المفترض أن ذلك يرجع إلى أن الفئران المتماثلة الزيجوت تعبر عن المزيد من البروجيرين. نرى تأثير استجابة متغاير الزيجوت مقابل متماثلي الزيجوت في تجاربنا الجينية

سؤال:من رولاند فويسنر: مرحبًا كولين، حديث لطيف. ما هو التأثير السلبي لزيادة تنظيم SUN1 في HGPS؟ رولاند
إجابة: من المحتمل أن يكون هناك ارتباط متزايد بين شبكة MT ومجمع LINC. يؤثر زيادة التعبير عن Sun/Nesprin في خلايا المزارع على وضع النواة وهجرة الخلايا

شرف لي أن ألتقي بعائلة باسو وبيرو. شكرًا لك على مشاركة رحلتك. أنت مصدر إلهام حقيقي!

شكرًا لعائلة سامي وألكسندرا على كونكم جزءًا من ورشة العمل ومشاركتكم رحلتكم الملهمة مع مرض الشيخوخة المبكرة!

تقدم رائع ايجر مع الموافقة في الأفق.

هل يمكننا تمديد هذه الجلسة إلى نهاية الأسبوع ومواصلة المناقشة؟ (شكرا لكم جميعا!) 

كانت هذه الورشة رائعة. أهنئ مؤسسة PRF على التزامها بإقامة هذا النشاط الرائع. لا شك أن هذه الورشة زودتني بالكثير من المعرفة لمستقبلي. كانت مذهلة. معًا سنجد العلاج!

لقد أذهلني دائمًا العلم المثير في اجتماعات PRF. كل التقدير للمنظمين على الحفاظ على تجربة ورشة العمل المجتمعية حتى في هذا الشكل الافتراضي!

أنتم جميعًا رائعون!!! شكرًا على هذه الفرصة الرائعة، أفكر في سنوات مضت، والآن أشعر وكأنني أعيش في المستقبل! يسعدني أن أكون جزءًا منها

أفتقد جيتار الدكتور كولين. عمل رائع!

شكرا جزيلا لك على تنظيم هذا الحدث، فهو حقا أبرز ما حدث في هذا الأسبوع!

شكرًا للجميع ونلتقي بكم شخصيًا في العام المقبل في كامبريدج !!

 شكرا لكم جميعا لانضمامكم إلينا!