उत्तर: पीके/पीडी अध्ययनों ने हृदय, महाधमनी और गुर्दे में 100% जैवउपलब्धता का संकेत दिया। हिस्टोलॉजिक परीक्षा और पीके/पीडी डेटा के आधार पर किडनी एकमात्र ऊतक था जहाँ संचय का सुझाव था। SRP-2001 की एकल खुराक प्रशासन ने प्रदर्शित किया कि PPMO हृदय से तेजी से साफ हो गया (2 घंटे के भीतर), महाधमनी से 4 घंटे के भीतर साफ हो गया, लेकिन गुर्दे में 48 घंटे के समय तक बना रहा। मात्रात्मक ddPCR ने अब तक परीक्षण की गई त्वचा (महाधमनी, हृदय, गुर्दे, यकृत, चतुर्भुज, हड्डी) को छोड़कर सभी ऊतकों में G608G क्रिप्टिक स्प्लिस अवरोध गतिविधि का प्रदर्शन किया, हालांकि ऊतक के आधार पर गतिविधि भिन्न होती है।

फ्रांसिस, माइक और वेन

उत्तर:इस सवाल के बारे में, ईमानदारी से कहूँ तो, मुझे इस सवाल का जवाब नहीं पता। हालाँकि, एक सामान्य वयस्क में, हम वाल्वुलर कैल्सीफिकेशन की डिग्री को Mg/Ca सेवन से नहीं जोड़ते हैं, भारी कैल्सीफिकेशन संभवतः अन्य कारकों के कारण होता है।

डॉ. पिनाक शाह

उत्तर: मैं डॉ. शाह की राय से सहमत हूँ। संभवतः एचजीपीएस में वाल्व कैल्सीफिकेशन के कारण बुजुर्ग रोगियों में देखे जाने वाले कारणों से अलग हैं। मुझे कैल्शियम और मैग्नीशियम मेटाबोलिज्म के बारे में भी कोई जानकारी नहीं है।

डॉ. फ्रांसेस्को मुसुमेसी

उत्तर: लेमिन ए/सी शून्य (एलएमएनए^-/-) माउस मॉडल में हृदय संबंधी कार्य में कमी के साथ डीसीएम विकसित होता है। इसके अलावा, ये चूहे हृदय चालन में दोष और व्यापक हृदय फाइब्रोसिस, और 5-8 सप्ताह की आयु में समय से पहले मृत्यु प्रदर्शित करते हैं (ऑगस्टे एट अल., 2018; फ्रॉक एट अल., 2012; सुलिवन, 1999)। हालांकि, केवल लैमिन ए (फोंग एट अल., 2006) या लैमिन सी (कॉफिनियर एट अल., 2010) की कमी वाले माउस मॉडल में हृदय संबंधी दोष नहीं दिखते हैं और उनका जीवनकाल सामान्य होता है।

संदर्भ:
ऑगस्टे, जी., गुरहा, पी., लोम्बार्डी, आर., कोर्फ़ा, सी., विलर्सन, जेटी, और मैरियन, एजे (2018)। हृदय में सक्रिय FOXO ट्रांसक्रिप्शन फैक्टर का दमन लैमिनोपैथी के माउस मॉडल में जीवन को लम्बा खींचता है. https://doi.org/10.1161/CIRCRESAHA.117.312052

कॉफ़िनियर, सी., जंग, एच.जे., ली, जेड., नोबुमोरी, सी., यूं, यू.जे., फरबर, ई.ए., डेविस, बी.एस., वेनस्टीन, एम.एम., यांग, एस.एच., लैमरडिंग, जे., फराहानी, जे.एन., बेंटोलिला, एल.ए., फोंग, एल.जी., और यंग, एस.जी. (2010)। प्रीलैमिन ए प्रसंस्करण को दरकिनार करते हुए लैमिन ए का प्रत्यक्ष संश्लेषण, फाइब्रोब्लास्ट में विकृत नाभिक का कारण बनता है, लेकिन चूहों में कोई पता लगाने योग्य विकृति नहीं होती है। जर्नल ऑफ बायोलॉजिकल केमिस्ट्री, 285(27), 20818–20826. https://doi.org/10.1074/jbc.M110.128835

फोंग, एलजी, बर्गो, एमओ, यंग, एसजी, फोंग, एलजी, एनजी, जेके, लैमरडिंग, जे., विकर्स, टीए, मेटा, एम., कोटे, एन., गेविनो, बी., क्यूओ, एक्स., चांग, एसवाई, यंग, एसआर, यांग, एसएच, स्टीवर्ट, सीएल, ली, आरटी, बेनेट, सीएफ, बर्गो, एमओ, और यंग, एसजी (2006)। प्रीलैमिन ए और लैमिन ए न्यूक्लियर लैमिना में अनावश्यक प्रतीत होते हैं। क्लीनिकल इन्वेस्टिगेशन का जर्नल, 116(3), 743–752. https://doi.org/10.1172/JCI27125.with

फ्रॉक, आरएल, चेन, एससी, दा, डी., फ्रेट, ई., लाउ, सी., ब्राउन, सी., पाक, डीएन, वांग, वाई., मुचिर, ए., वर्मन, एचजे, सैंटाना, एलएफ, लेडीज, डब्ल्यूसी, राबिनोविच, पीएस, और केनेडी, बीके (2012)। लैमिन ए की कार्डियोमायोसाइट-विशिष्ट अभिव्यक्ति एलएमएनए-/- चूहों में हृदय समारोह में सुधार करती है। एक और, 7(8), 1–9. https://doi.org/10.1371/journal.pone.0042918

सुलिवन, टी. (1999). ए-टाइप लेमिन अभिव्यक्ति की हानि से न्यूक्लियर लिफ़ाफ़े की अखंडता प्रभावित होती है जिससे मस्कुलर डिस्ट्रॉफी होती है। कोशिका जैविकी शोधपत्रिका, 147(5), 913–920. https://doi.org/10.1083/jcb.147.5.913

सवाल: टॉम मिस्टेली से: पशुओं में लोनाफार्निब + टोजिलिज़ुमाब उपचार कितने समय तक चला?
उत्तर: हमने विषमयुग्मी जानवरों पर 22वें सप्ताह से 30वें सप्ताह तक एक प्रारंभिक प्रयोग किया। हम इस समय सीमा पर ध्यान केंद्रित करना चाहते हैं, ताकि वजन बढ़ने पर उस प्रभाव का मूल्यांकन किया जा सके, जो पहले टोसिलिज़ुमाब के साथ देखा गया था।

सवाल: स्गोन्ज़ालो से: सुंदर कहानी जियोवाना और सैमी!!! क्या आपको टोसिलिज़ुमाब उपचार के कोई दुष्प्रभाव दिखे? या कोई ऐसा फेनोटाइप जो प्रोजेरिया चूहों में नहीं सुधर पाया? डॉ. जियोवाना लतान्ज़ी से: प्रश्न: टॉम मिस्टेली से: जानवरों में लोनाफरनिब + टोजिलिज़ुमाब उपचार कितने समय तक चला?
उत्तर: शुक्रिया सुज़ाना। नहीं, हमें टोसिलिज़ुमाब का कोई साइड इफ़ेक्ट नहीं दिखा। जांचे गए फेनोटाइप (काइफोसिस, एडीपोज़ टिशू डिस्ट्रोफी, बाल और त्वचा के दोष, लोकोमोटर एक्टिविटी, महाधमनी के घाव और मायोकार्डियम हाइपरट्रॉफी) में देरी/सुधार हुआ।

टिप्पणी: मैरी गेरहार्ड-हरमन से: रुमेटोलॉजिस्ट रोग और वास्कुलिटिस के लिए भी अमेरिका में इसका उपयोग किया जाता है
जवाब: वैस्कुलिटिस के उपयोग पर इस दिलचस्प जानकारी के लिए मैरी को धन्यवाद।

टिप्पणी: पीसी स्टेफानो से: टोसिलिज़ुमैब को जापान में कैसलमैन रोग के इलाज के लिए भी मंजूरी दी गई है, जिसमें कोई प्रतिरक्षा-दमनकारी प्रभाव नहीं है
जवाब: इन जानकारियों के लिए धन्यवाद स्टेफानो।

सवाल: डेल्फिन लारियू से: क्या आपको एचजीपीएस कोशिकाओं/एचजीपीएस माउस मॉडल में प्रोजेरिनिन उपचार से डीएनए क्षति में कोई कमी दिखाई देती है?
उत्तर: हमने देखा कि प्रोजेरिनिन से उपचार के बाद डीएनए मरम्मत से संबंधित जीन (बीआरसीए1, रेड51, आदि) में परिवर्तन हुआ।

सवाल: डेल्फिन लारियू से: वर्नर में प्रोजेरिनिन कैसे काम करता है
सिंड्रोम जो - जहाँ तक मुझे पता है - प्रोजेरिन को व्यक्त नहीं करता है? क्या अणु का कोई अन्य लक्ष्य है?
उत्तर: WS कोशिकाएं भी सामान्य वृद्धों की तरह थोड़ी मात्रा में प्रोजेरिन का उत्पादन कर सकती हैं
हमने mRNA स्तर पर WS कोशिकाओं में प्रोजेरिन अभिव्यक्ति देखी।
हमारा मानना है कि WRN प्रोटीन प्रोजेरिन को रोकने का काम कर सकता है।
WS रोगियों के मामले में, चूंकि कोई WRN प्रोटीन नहीं है, प्रोजेरिन अभिव्यक्ति है
माना जाता है कि यह 20 और 30 की उम्र में होता है, जैसा कि सामान्य रूप से देखा जाता है
लोग।

सवाल: बॉब बिशप से: क्या प्रोजेरिनिन बाइंडिंग साइट को जैव रासायनिक रूप से परिभाषित किया गया है या नहीं?
संरचनात्मक रूप से? क्या अतिरिक्त यौगिकों को खोजने के लिए कोई जैव रासायनिक परख है
इस तंत्र के साथ?
उत्तर: हमने बायोटिन-एविडिन बीड पुल-डाउन परख किया और देखा
पेरोजेरिनिन की प्रोजेरिन के साथ विशिष्ट अंतःक्रिया लेकिन लैमिन ए, लैमिन के साथ नहीं
बी, पी53, या एमेरिन।
हमने अतिरिक्त यौगिकों को खोजने के लिए एलिसा परख भी किया
संभावित प्रोजेरिन/लैमिन ए-बाइंडिंग अवरोधक हो सकते हैं। प्रोजेरिन पुनः संयोजक प्रोटीन को रासायनिक लाइब्रेरी और लैमिन ए के साथ क्रमिक रूप से संवर्धित किया गया।
हालाँकि, प्रोजेरिनिन रसायन में सबसे प्रभावी रसायन था
पुस्तकालय।

सवाल: जॉन कुक से: डॉ. किम, बहुत बढ़िया प्रगति। क्या प्रोजेरिनिन कम करता है?
एसएएसपी साइटोकाइन्स का स्राव?
उत्तर: हमने देखा कि प्रोजेरिनिन IL6 और IL8 की अभिव्यक्ति को कम कर सकता है।
एचजीपीएस कोशिकाएं.

सवाल: सुसान माइकेलिस से: क्या प्रोजेरिनिन शोधकर्ताओं के लिए उपलब्ध है?
उत्तर: बेशक, यदि आप अनुरोध करें तो यह उपलब्ध है।

सवाल: थॉमस डब्ल्यू ग्लोवर से: हो सकता है कि मैं इसे भूल गया हूं, लेकिन आपको क्या लगता है कि क्या है?
वर्नर सिंड्रोम में लाभकारी प्रभावों के लिए जिम्मेदार तंत्र क्या है?
उत्तर: डब्ल्यू.एस. रोगियों से प्राप्त कोशिकाएं भी थोड़ी मात्रा में प्रोजेरिन का उत्पादन करती हैं,
वृद्ध लोगों से प्राप्त सामान्य कोशिकाओं की तरह ही प्रोजेरिनिन भी हो सकता है
प्रोजेरिन अभिव्यक्ति को कम करके WS कोशिकाओं में प्रभावी।

उत्तर: प्रश्न के लिए धन्यवाद: नहीं, यह वास्तव में सूजन नहीं है। आंशिक रूप से सूजन से संबंधित, हमने इस परियोजना में मैक्रोफेज का अध्ययन किया है और पाया है कि नॉकआउट आईसीएमटी मैक्रोफेज कोलेस्ट्रॉल इफ्लक्स को बढ़ाता है, दोनों बेसल और एपोएआई- और एचडीएल-उत्तेजित। चूंकि यह प्रभाव कभी-कभी विवो में बढ़े हुए रिवर्स कोलेस्ट्रॉल परिवहन से जुड़ा होता है, इसलिए हम यह निर्धारित करना चाहेंगे कि क्या आईसीएमटी अवरोध से एथेरोस्क्लेरोसिस का विकास कम हो जाएगा।

सवाल: वैंड्रस से: क्या आपने विभिन्न आयु के मानव एचजीपीएस फाइब्रोब्लास्टों में डीएनए सुधार (इन विट्रो) का प्रयास किया है और उनके फेनोटाइप के सामान्यीकरण का परीक्षण किया है, यह देखने के लिए कि क्या यह कोशिकाओं की आयु बढ़ने के साथ घटता है?
उत्तर: नहीं, हमने कई अलग-अलग आयु के रोगियों के फाइब्रोब्लास्ट में सुधार का प्रयास नहीं किया है - केवल दो अलग-अलग रोगियों के फाइब्रोब्लास्ट में सुधार का प्रयास किया है, जिसमें समान परिणाम प्राप्त हुए हैं।

सवाल: डेल्फिन लैरीयू से: अद्भुत प्रभाव! क्या आप विषमयुग्मी चूहों में पूर्ण प्रोजेरिन KO की अपेक्षा करेंगे?
उत्तर: एकल-प्रति माउस में, मैं वर्तमान में देखी जा रही संपादन दक्षता से बहुत अधिक भिन्न संपादन दक्षता की अपेक्षा नहीं करूंगा, क्योंकि प्रत्येक प्रोजेरिन के लिए पहले से ही संपादन एजेंट की अधिकता होनी चाहिए।

सवाल: आंद्रे मोंटेइरो दा रोचा से: क्या आपको लगता है कि कम प्रतिशत कोशिकाओं की पुनः प्रोग्रामिंग से स्टेम सेल की कार्यप्रणाली को दुरुस्त किया जा सकता है, लेकिन इससे वयस्क स्टेम सेल समाप्त हो सकती है?
उत्तर: हमारे पास ऐसा कोई डेटा नहीं है जो इस प्रश्न का उत्तर दे सके।

सवाल: मेई से: कार्डियोमायोसाइट जैसा दिखता है, सुंदर धुंधलापन!
एबी बुचवाल्टर से: क्या प्रभावी नकारात्मक Sun1 अभिव्यक्ति सभी LINC परिसरों को बाधित करती है, जिनमें Sun2 द्वारा मध्यस्थता वाले भी शामिल हैं?
उत्तर: हां, इसके लिए इन विट्रो में साक्ष्य मौजूद हैं कि NE में सभी Nesprins को DNSUN1 द्वारा विस्थापित किया जा सकता है।

सवाल: सुएट नी चेन से: कैसे और क्या तंत्र है कि AAV9-SunDn दीर्घकालिक प्रभाव डालने में सक्षम है? आपने किस उम्र में LMNA उत्परिवर्ती चूहों को AAV9-Sun1DN इंजेक्शन दिया था?
उत्तर: हमने लैमिनए को हटाने के लिए क्रे रीकॉम्बिनेज को प्रेरित करने के एक दिन बाद DNSUN1 AAV को इंजेक्ट किया। हमारे पास डेटा है कि AAV द्वारा वितरित DNSUN1 इंजेक्शन के एक साल बाद भी कार्डियोमायोसाइट्स में व्यक्त किया जाता है। अब जब हम प्रयोगशाला में वापस आ गए हैं और पर्याप्त मात्रा में अपना खुद का AAV बना सकते हैं, तो हम खुराक/समय/प्रतिक्रिया प्रयोग कर रहे हैं।

सवाल: मार्टिन बर्गो से, फोरस्किंग के लिए वाइसफ़ोर्डफ़ोरांडे कमिटन: आपके अनुसार आपके एलएमएनए नॉकआउट प्रयोगों में अनुपस्थित लेमिन ए बनाम लेमिन सी का सापेक्ष योगदान क्या है?
उत्तर: मैं इस बारे में निश्चित नहीं हूं, लेकिन Sun1 LaminA के साथ अंतःक्रिया करता है और HGPS चूहों में योगदान सभी LaminA (जिससे प्रोजेरिन प्राप्त होता है) का होना चाहिए।

सवाल: jcampisi से: SUN1 KO या hets में मृत्यु का कारण क्या है?
उत्तर: अच्छा सवाल है, हम अभी भी नहीं जानते लेकिन वर्तमान में कुछ कंकाल मांसपेशी समूह पर संदेह है, हमें मरने वाले चूहों का एक सभ्य हिस्टो-पैथो विश्लेषण करने की आवश्यकता है

सवाल: टॉम मिस्टेली से: कॉलिन: क्या आपने एलएमएनए/सन जानवरों में कोशिकीय तनाव प्रतिक्रिया पथ में परिवर्तन देखा है?
उत्तर: हमने अभी तक इन चूहों में किसी भी तनाव प्रतिक्रिया जीन/मार्कर को नहीं मापा है

प्रश्न: डेल्फिन लारियू से: क्या आप एचजीपीएस रोगियों में डीएनएसयूएन1 के साथ केवल हृदय को लक्ष्य करने की परिकल्पना करेंगे?
उत्तर: सीरोटाइप और कार्डियोमायोसाइट विशिष्ट प्रमोटर के उपयोग को देखते हुए यह संभव है। ये प्रयोग अभी प्रगति पर हैं

सवाल:यूएक्सिया वांग से: क्यों KO SUN1 का समयुग्मीय G609G चूहों पर कम लाभ है?
उत्तर: संभवतः इसलिए क्योंकि होमोज़ीगोज़ चूहे ज़्यादा प्रोजेरिन व्यक्त कर रहे हैं। हम अपने आनुवंशिक प्रयोगों में हेटेरोज़ीगोट्स बनाम होमोज़ीगोट्स के प्रतिक्रिया प्रभाव को देखते हैं

सवाल:रोलांड फ़ॉइसनर से: हाय कॉलिन, बढ़िया बातचीत। HGPS में अपरेगुलेटेड SUN1 का नकारात्मक प्रभाव क्या है। रोलांड
उत्तर: संभवतः LINC कॉम्प्लेक्स के साथ MT नेटवर्क का जुड़ाव बढ़ गया है। कल्चर कोशिकाओं में सन/नेस्प्रिन की अभिव्यक्ति बढ़ने से न्यूक्लियर पोजिशनिंग और सेल माइग्रेशन पर असर पड़ता है

बासो और पेरौट परिवार से मिलना सम्मान की बात है। अपनी यात्रा साझा करने के लिए धन्यवाद। आप वाकई प्रेरणास्रोत हैं!

कार्यशाला का हिस्सा बनने और प्रोजेरिया के साथ अपनी प्रेरणादायक यात्रा को साझा करने के लिए सामी और एलेक्जेंड्रा के परिवार को धन्यवाद!

शानदार प्रगति, एइगर, अनुमोदन क्षितिज पर है।

क्या हम इस सत्र को सप्ताह के अंत तक बढ़ा सकते हैं और चर्चा जारी रख सकते हैं? (आप सभी का धन्यवाद!) 

यह कार्यशाला अविश्वसनीय थी। मैं इस महान गतिविधि को करने की प्रतिबद्धता के लिए पीआरएफ को बधाई देता हूं। निःसंदेह, इस कार्यशाला ने मुझे मेरे भविष्य के लिए बहुत सारी जानकारी दी। यह अद्भुत था। हम साथ मिलकर इसका इलाज खोज लेंगे!

पीआरएफ बैठकों में रोमांचक विज्ञान से हमेशा प्रभावित होता हूँ। इस आभासी प्रारूप में भी सामुदायिक कार्यशाला के अनुभव को संरक्षित करने के लिए आयोजकों को बहुत-बहुत बधाई!

आप सभी कमाल के हैं!!! इस बेहतरीन अवसर के लिए धन्यवाद, कई साल पहले की बात सोचकर अब ऐसा लग रहा है कि जैसे भविष्य में जीना है! इसका हिस्सा बनकर खुशी हुई

मुझे डॉ. कोलिन का गिटार याद आता है। बहुत बढ़िया काम!

इस आयोजन के लिए आपका बहुत-बहुत धन्यवाद, यह सचमुच मेरे सप्ताह का मुख्य आकर्षण था!

सभी को धन्यवाद और अगले वर्ष कैम्ब्रिज में आपसे व्यक्तिगत रूप से मुलाकात होगी!!

 हमसे जुड़ने के लिए आप सभी का धन्यवाद!