جواب: PK/PD مطالعہ دل، شہ رگ اور گردے میں 100% جیو دستیابی کی نشاندہی کرتا ہے۔ گردے واحد ٹشو تھا جہاں ہسٹولوجک امتحان اور PK/PD ڈیٹا کی بنیاد پر جمع ہونے کی تجویز تھی۔ SRP-2001 کی واحد خوراک کی انتظامیہ نے یہ ظاہر کیا کہ PPMO دل سے تیزی سے صاف ہو گیا (2 گھنٹے کے اندر)، شہ رگ سے 4 گھنٹے کے اندر صاف ہو گیا، لیکن گردے میں 48 گھنٹے کے ٹائم پوائنٹ تک برقرار رہا۔ مقداری ddPCR نے تمام ٹشوز میں G608G کریپٹک سپلائس کی روک تھام کی سرگرمی کا مظاہرہ کیا سوائے جلد کے جس کا اب تک تجربہ کیا گیا ہے (شہ رگ، دل، گردے، جگر، کواڈریسیپس، ہڈی)، حالانکہ سرگرمی ٹشو کے لحاظ سے مختلف ہوتی ہے۔

فرانسس، مائیک، اور وین

جواب:سوال کے بارے میں، سچ پوچھیں تو، مجھے اس سوال کا جواب نہیں معلوم۔ تاہم، ایک عام بالغ میں، ہم والوولر کیلکیفیکیشن کی ڈگری کو Mg/Ca کی مقدار سے نہیں جوڑتے ہیں، بھاری کیلکیفیکیشن کا امکان دیگر عوامل کی وجہ سے ہوتا ہے۔

ڈاکٹر پنک شاہ

جواب: میں ڈاکٹر شاہ کی رائے سے متفق ہوں۔ ممکنہ طور پر HGPS میں والو کیلسیفیکیشن کی وجوہات اس سے مختلف ہیں جو ہم بوڑھے مریضوں میں دیکھتے ہیں۔ مجھے Ca اور Mg میٹابولزم کے بارے میں بھی کوئی علم نہیں ہے۔

ڈاکٹر فرانسسکو میوزیمیسی

جواب: لامین A/C null (Lmna^-/-) ماؤس ماڈل DCM تیار کرتا ہے جس کے ساتھ کارڈیک فنکشن کا نقصان ہوتا ہے۔ مزید یہ کہ، یہ چوہے دل کی ترسیل اور وسیع کارڈیک فائبروسس میں نقائص ظاہر کرتے ہیں، اور 5-8 ہفتوں کی عمر میں قبل از وقت موت (اگست ایٹ ال۔، 2018؛ فراک ایٹ ال۔، 2012؛ سلیوان، 1999)۔ تاہم، ماؤس کے ماڈلز جن میں صرف Lamin A (Fong et al., 2006) یا lamin C (Coffinier et al., 2010) کی کمی ہوتی ہے وہ قلبی نقائص نہیں دکھاتے ہیں اور ان کی عمر عام ہوتی ہے۔

حوالہ جات:
Auguste, G., Gurha, P., Lombardi, R., Coarfa, C., Willerson, JT, & Marian, AJ (2018)۔ دل میں فعال FOXO ٹرانسکرپشن عوامل کو دبانا لیمینوپیتھیز کے ماؤس ماڈل میں بقا کو طول دیتا ہے۔. https://doi.org/10.1161/CIRCRESAHA.117.312052

Coffinier, C., Jung, HJ, Li, Z., Nobumori, C., Yun, UJ, Farber, EA, Davies, BS, Weinstein, MM, Yang, SH, Lammerding, J., Farahani, JN, Bentolila, LA, Fong, LG, & Young, SG (2010)۔ lamin A کی براہ راست ترکیب، prelamin a پروسیسنگ کو نظرانداز کرتے ہوئے، fibroblasts میں misshapen nuclei کا سبب بنتی ہے لیکن چوہوں میں کوئی قابل شناخت پیتھالوجی نہیں ہے۔ حیاتیاتی کیمسٹری کا جرنل, 285(27)، 20818–20826۔ https://doi.org/10.1074/jbc.M110.128835

Fong, LG, Bergo, MO, Young, SG, Fong, LG, Ng, JK, Lammerding, J., Vickers, TA, Meta, M., Coté, N., Gavino, B., Qiao, X., Chang , SY, Young, SR, Yang, SH, Stewart, CL, Lee, RT, Bennett, CF, Bergo, MO, & Young, ایس جی (2006)۔ Prelamin A اور lamin A جوہری لامینا میں قابلِ استعمال دکھائی دیتے ہیں۔ جرنل آف کلینیکل انویسٹی گیشن, 116(3)، 743–752۔ https://doi.org/10.1172/JCI27125.with

فراک، آر ایل، چن، ایس سی، دا، ڈی، فریٹ، ای، لاؤ، سی.، براؤن، سی، پاک، ڈی این، وانگ، وائی، مچیر، اے، ورمن، ایچ جے، سنتانا، ایل ایف، Ladiges, WC, Rabinovich, PS, & Kennedy, BK (2012)۔ لامین اے کا کارڈیو مایوسائٹ مخصوص اظہار Lmna-/- چوہوں میں کارڈیک فنکشن کو بہتر بناتا ہے۔ پلس ون, 7(8)، 1-9۔ https://doi.org/10.1371/journal.pone.0042918

سلیوان، ٹی (1999)۔ A-type lamin expression کا نقصان جوہری لفافے کی سالمیت سے سمجھوتہ کرتا ہے جس کے نتیجے میں عضلاتی ڈسٹروفی ہوتی ہے۔ جرنل آف سیل بیالوجی, 147(5)، 913-920۔ https://doi.org/10.1083/jcb.147.5.913

سوال: ٹام میسٹیلی سے: جانوروں میں لونافرنیب + ٹوزیلیزوماب کا علاج کب تک تھا؟
جواب: ہم نے متفاوت جانوروں پر ایک ابتدائی تجربہ کیا جو ہفتہ 22 سے 30 ہفتہ تک شروع ہوتا ہے۔ ہم وزن میں اضافے پر اثرات کا جائزہ لینے کے لیے اس ٹائم فریم پر توجہ مرکوز کرنا چاہتے ہیں جو پہلے ٹوکیلیزوماب کے ساتھ دیکھا گیا تھا۔

سوال: Sgonzalo سے: خوبصورت کہانی جیوانا اور سیمی!!! کیا آپ نے tocilizumab علاج کے کوئی مضر اثرات دیکھے ہیں؟ یا کوئی فینوٹائپس جو پروجیریا چوہوں میں بہتر نہیں ہوئی تھیں؟ ڈاکٹر Giovanna Lattanzi سے: سوال: tom misteli سے: lonafarnib + tozilizumab کا جانوروں میں علاج کب تک ہوتا تھا؟
جواب: شکریہ سوزانا۔ نہیں، ہم نے tocilizumab کا کوئی مضر اثر نہیں دیکھا۔ جانچے گئے فینوٹائپس میں (کائفوس، ایڈیپوز ٹشو ڈسٹروفی، بالوں اور جلد کے نقائص، لوکوموٹر ایکٹیویٹی، شہ رگ کے گھاووں اور مایوکارڈیم ہائپر تھروفی) میں تاخیر/بہتری ہوئی تھی۔

تبصرہ: MARIE GERHARD-HERMAN سے: امریکہ میں ریمیٹولوجسٹ کی بیماری اور ویسکولائٹس کے لیے بھی استعمال ہوتا ہے
جواب: ویسکولائٹس کے استعمال کے بارے میں اس دلچسپ معلومات کے لئے میری کا شکریہ۔

تبصرہ: پی سی سٹیفانو کی طرف سے: جاپان میں کیسل مین بیماری کے علاج کے لیے توسیلیزوماب کی بھی منظوری دی گئی ہے جس کے بغیر مدافعتی اثرات ہیں
جواب: ان معلومات کے لیے سٹیفانو کا شکریہ۔

سوال: ڈیلفائن لارریو سے: کیا آپ HGPS سیلز/HGPS ماؤس ماڈلز میں پروجیرینن ٹریٹمنٹ سے ڈی این اے کو پہنچنے والے نقصان میں کمی دیکھتے ہیں؟
جواب: ہم نے مشاہدہ کیا کہ ڈی این اے کی مرمت سے متعلق جین (BRCA1، Rad51، وغیرہ) کو پروجیرینن کے ساتھ علاج کے بعد تبدیل کیا گیا تھا۔

سوال: ڈیلفائن لیریو سے: ورنر میں پروجیرینن کیسے کام کرتا ہے۔
سنڈروم جو - جہاں تک میں جانتا ہوں - پروجیرین کا اظہار نہیں کرتا ہے؟ کیا مالیکیول کا کوئی اور ہدف ہے؟
جواب: ڈبلیو ایس کے خلیے بھی عام عمر کی طرح تھوڑی مقدار میں پروجیرین پیدا کر سکتے ہیں۔
خلیات ہم نے ایم آر این اے کی سطح پر ڈبلیو ایس خلیوں میں پروجیرن اظہار کا مشاہدہ کیا۔
ہمارا خیال ہے کہ ڈبلیو آر این پروٹین پروجیرین کو روکنے کے لیے کام کر سکتا ہے۔ تاہم، میں
WS مریضوں کے معاملے میں، چونکہ کوئی WRN پروٹین نہیں ہے، progerin اظہار ہے۔
20 اور 30 کی دہائی میں ہونے کے بارے میں سوچا جاتا ہے، جتنا یہ عام طور پر عمر رسیدہ افراد میں دیکھا جاتا ہے۔
لوگ

سوال: باب بشپ سے: کیا پروجیرینن بائنڈنگ سائٹ کو بائیو کیمیکل طور پر بیان کیا گیا ہے یا؟
ساختی طور پر؟ کیا اضافی مرکبات تلاش کرنے کے لیے کوئی بائیو کیمیکل پرکھ ہے؟
اس میکانزم کے ساتھ؟
جواب: ہم نے بایوٹین-ایوڈن مالا پل-ڈاون پرکھ کا مظاہرہ کیا اور مشاہدہ کیا۔
پروجیرین کے ساتھ پیروجیرینن کا مخصوص تعامل لیکن لامین اے، لامین کے ساتھ نہیں۔
B، p53، یا ایمرین۔
ہم نے اضافی مرکبات تلاش کرنے کے لئے ایلیسا پرکھ بھی انجام دیا جو ہوسکتا ہے۔
پوٹیٹیو پروجیرین/لامین اے بائنڈنگ انحیبیٹرز بنیں۔ پروجیرین ریکومبیننٹ پروٹین کو کیمیکل لائبریری اور لامین اے کے ساتھ ترتیب وار انکیوبیٹ کیا گیا تھا۔
تاہم، کیمیکل میں پروجیرینن سب سے زیادہ موثر کیمیکل تھا۔
لائبریری

سوال: جان کوک کی طرف سے: عظیم پیش رفت ڈاکٹر کم۔ کیا پروجیرینن کو کم کرتا ہے؟
SASP سائٹوکائنز کا سراو؟
جواب: ہم نے مشاہدہ کیا کہ پروجیرینن IL6 اور IL8 کے اظہار کو کم کر سکتا ہے۔
HGPS خلیات۔

سوال: سوسن مائیکلس سے: کیا پروجیرینن محققین کے لیے دستیاب ہے؟
جواب: یقینا، اگر آپ درخواست کرتے ہیں تو یہ دستیاب ہے۔

سوال: تھامس ڈبلیو گلوور سے: میں نے اسے یاد کیا ہو گا لیکن آپ کے خیال میں یہ کیا ہے؟
Werner سنڈروم میں فائدہ مند اثرات کے لئے ذمہ دار طریقہ کار؟
جواب: WS مریضوں سے حاصل کردہ خلیات بھی تھوڑی مقدار میں پروجرین تیار کرتے ہیں، جیسا کہ
زیادہ عمر کے لوگوں سے حاصل کردہ عام خلیات کے طور پر. پروجیرینن بھی ہو سکتا ہے۔
پروجیرین اظہار کو کم کرکے ڈبلیو ایس خلیوں میں موثر۔

جواب: سوال کے لیے شکریہ: نہیں، فی نفسہ سوزش نہیں۔ جزوی طور پر سوزش سے متعلق، ہم نے اس پروجیکٹ میں میکروفیجز کا مطالعہ کیا ہے اور پتہ چلا ہے کہ ناک آؤٹ آئی سی ایم ٹی میکروفیج کولیسٹرول کے بہاؤ کو بڑھاتا ہے، دونوں بیسل اور ApoAI- اور HDL- محرک۔ چونکہ یہ اثر کبھی کبھی Vivo میں ریورس کولیسٹرول کی نقل و حمل سے منسلک ہوتا ہے، ہم اس بات کا تعین کرنا چاہیں گے کہ آیا آئی سی ایم ٹی روکنا atherosclerosis کی ترقی کو کم کرے گا۔

سوال: وینڈریس سے: کیا آپ نے مختلف عمروں کے انسانی ایچ جی پی ایس فائبرو بلاسٹس میں ڈی این اے درست کرنے کی کوشش کی ہے (ان وٹرو) اور ان کے فینوٹائپ کو نارملائز کرنے کا تجربہ کیا ہے تاکہ یہ معلوم کیا جا سکے کہ کیا یہ خلیات کی عمر کے ساتھ کم ہوتا ہے؟
جواب: نہیں، ہم نے کئی مختلف عمروں کے مریضوں سے فبرو بلوسٹس میں اصلاح کی کوشش نہیں کی ہے - صرف دو مختلف مریضوں سے، جس کے ایک جیسے نتائج برآمد ہوئے۔

سوال: ڈیلفائن لیریو سے: حیرت انگیز اثرات! کیا آپ heterozygous چوہوں میں مکمل progerin KO کی توقع کریں گے؟
جواب: سنگل کاپی ماؤس میں، میں ضروری طور پر اس سے کہیں زیادہ مختلف ایڈیٹنگ افادیت کی توقع نہیں کروں گا جس کا ہم فی الحال مشاہدہ کرتے ہیں، کیونکہ ہر پروجیرین کے لیے پہلے سے ہی ایڈیٹنگ ایجنٹ کی زیادتی ہونی چاہیے۔

سوال: آندرے مونٹیرو ڈا روچا سے: کیا آپ کو لگتا ہے کہ خلیات کی کم فیصد کو دوبارہ پروگرام کرنے سے اسٹیم سیل کے فنکشن کو ٹھیک کیا جاسکتا ہے، لیکن یہ بالغ اسٹیم سیل کی تھکن کا باعث بن سکتا ہے؟
جواب: ہمارے پاس کوئی ڈیٹا نہیں ہے جو اس سوال کا جواب دے سکے۔

سوال: Mei کی طرف سے: cardiomyocyte کی طرح لگتا ہے، خوبصورت داغ!
Abby Buchwalter کی طرف سے: کیا غالب منفی Sun1 اظہار تمام LINC کمپلیکس کو متاثر کرتا ہے، بشمول Sun2 کے ذریعے ثالثی کرنے والے؟
جواب: ہاں وٹرو میں اس کے ثبوت موجود ہیں کہ NE میں تمام Nesprins کو DNSUN1 کے ذریعے بے گھر کیا جا سکتا ہے۔

سوال: Suet Nee Chen سے: AAV9-SunDn طویل مدتی اثرات مرتب کرنے کے قابل کیسے اور کیا طریقہ کار ہے؟ آپ نے کس عمر میں LMNA اتپریورتی چوہوں کو AAV9-Sun1DN انجیکشن لگایا تھا؟
جواب: ہم نے ڈی این ایس یو این 1 اے اے وی کو لیمین اے کو حذف کرنے کے لئے کر ریکومبینیس کو آمادہ کرنے کے ایک دن بعد انجیکشن لگایا۔ ہمارے پاس ڈیٹا ہے کہ AAV کے ذریعے فراہم کردہ DNSUN1 انجیکشن کے ایک سال بعد کارڈیو مایوسائٹس میں ظاہر ہوتا رہتا ہے۔ اب ہم خوراک/وقت/ردعمل کے تجربات کر رہے ہیں جب کہ ہم دوبارہ لیب میں آ گئے ہیں اور کافی مقدار میں اپنا AAV بنا سکتے ہیں۔

سوال: مارٹن برگ سے، وائسورڈفرانڈ کمیٹن فار فارسکنگ: آپ کے خیال میں آپ کے Lmna ناک آؤٹ تجربات میں غیر حاضر lamin A بمقابلہ lamin C کا رشتہ دار حصہ کیا ہے؟
جواب: مجھے اس کے بارے میں یقین نہیں ہے لیکن Sun1 LaminA کے ساتھ بات چیت کرتا ہے اور HGPS چوہوں میں شراکت تمام LaminA ہونی چاہیے (جس سے پروجرین اخذ کیا گیا ہے)

سوال: jcampisi سے: SUN1 KO یا ہیٹس میں موت کی وجہ کیا ہے؟
جواب: اچھا سوال ہم ابھی تک نہیں جانتے لیکن فی الحال کچھ کنکال کے پٹھوں کے گروپ پر شبہ ہے ہمیں مرتے ہوئے چوہوں کے مہذب ہسٹو پیتھو تجزیہ کی ضرورت ہے۔

سوال: Tom Misteli سے: کولن: کیا آپ نے Lmna/Sun جانوروں میں سیلولر تناؤ کے ردعمل کے راستوں میں تبدیلیاں دیکھی ہیں؟
جواب: ہم نے ابھی تک ان چوہوں میں تناؤ کے ردعمل کے جین/مارکر کی پیمائش نہیں کی ہے۔

سوال: ڈیلفائن لیریو سے: کیا آپ HGPS مریضوں میں DNSUN1 کے ساتھ صرف دل کو نشانہ بنانے کا تصور کریں گے؟
جواب: کارڈیو مایوسائٹ مخصوص پروموٹر کے سیرو ٹائپ اور استعمال کے پیش نظر یہ ممکن ہے۔ وہ تجربات اس وقت جاری ہیں۔

سوال:Yuexia Wang سے: KO SUN1 کو ہوموزائگس G609G چوہوں پر کم فائدہ کیوں ہے؟
جواب: شاید اس لیے کہ ہوموزائگس چوہے زیادہ پروجیرین کا اظہار کر رہے ہیں۔ ہم اپنے جینیاتی تجربات میں heterozygotes v homozygotes کے ردعمل کا اثر دیکھتے ہیں۔

سوال:رولینڈ فوزنر سے: ہیلو کولن، اچھی بات۔ HGPS میں upregulated SUN1 کا منفی اثر کیا ہے؟ رولینڈ
جواب: ممکنہ طور پر LINC کمپلیکس کے ساتھ MT نیٹ ورک کی وابستگی میں اضافہ ہوا ہے۔ ثقافتوں کے خلیوں میں سورج/نیسپرین کے اظہار میں اضافہ نیوکلیئر پوزیشننگ اور سیل کی منتقلی کو متاثر کرتا ہے۔

باسو اور پیراؤٹ فیملی سے ملنا اعزاز۔ اپنا سفر بانٹنے کے لیے آپ کا شکریہ۔ آپ واقعی اور پریرتا ہیں!

ورکشاپ کا حصہ بننے اور پروجیریا کے ساتھ اپنے متاثر کن سفر کا اشتراک کرنے کے لیے سامی اور الیگزینڈرا کے خاندان کا شکریہ!

افق پر منظوری کے ساتھ شاندار پیشرفت ایگر۔

کیا ہم اس سیشن کو ہفتے کے آخر تک بڑھا سکتے ہیں اور بحث کو جاری رکھ سکتے ہیں؟ (آپ کا شکریہ، ایک اور سب!) 

یہ ورکشاپ ناقابل یقین تھا۔ میں PRF کو اس عظیم سرگرمی کو انجام دینے کے عزم کے لیے مبارکباد پیش کرتا ہوں۔ بلا شبہ، اس ورکشاپ نے مجھے اپنے مستقبل کے لیے بہت سے علم سے بھر دیا۔ یہ حیرت انگیز تھا۔ ہم مل کر علاج تلاش کریں گے!

PRF میٹنگز میں دلچسپ سائنس سے ہمیشہ متاثر ہوں۔ اس ورچوئل فارمیٹ میں بھی کمیونٹی ورکشاپ کے تجربے کو محفوظ رکھنے کے لیے منتظمین کو بہت شکریہ!

آپ سب راک!!! اس عظیم موقع کے لئے شکریہ، کئی سال پہلے کے بارے میں سوچ رہا تھا، اب یہ مستقبل میں رہنا پسند ہے! اس کا حصہ بن کر خوشی ہوئی۔

مجھے ڈاکٹر کولن کا گٹار یاد آتا ہے۔ بہت اچھا کام!

اس کو منظم کرنے کے لیے آپ کا بہت شکریہ، واقعی میرے ہفتے کی خاص بات!

سب کا شکریہ اور اگلے سال کیمبرج میں ذاتی طور پر ملیں گے!!

 ہمارے ساتھ شامل ہونے کے لیے آپ سب کا شکریہ!